A matéria orgânica (MO) é um quelante natural com capacidade de diminuir a disponibilidade de cobre (Cu) para as plantas, principalmente, quando cultivadas em sistema de plantio direto (SPD). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de doses de Cu sobre a produção e fertilidade do solo na rotação trigo (Triticum aestivum) e soja (Glycine max) em SPD. O delineamento experimental foi o blocos casualizados em parcelas subdividida com quatro repetições. As parcelas consistiram na aplicação de cinco doses de Cu (0, 1, 2, 4 e 8 kg ha-1) em cobertura e a subparcelas os períodos de cultivo. As doses de Cu influenciaram a produção de grãos de trigo e soja. Em solo com alto teor de MO, os extratores DTPA-TEA e Mehlich 1 apresentaram correlação significativa na determinação do Cu disponível, sendo que o DTPA-TEA teve o melhor ajuste (R2) em função das doses de Cu aplicada.